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Pavone對類器官樣品進行機械性能篩選

更新時間:2024-02-01      點擊次數:221

類器官是具有與活體器官相似生理結構和功能的三維組織培養物。與傳統的二維細胞培養相比,類器官在體外提供了更準確的環境表征。類器官提供了一個研究3D力學方面的框架,將機械生物學整合到類器官技術中可以創建更多與生理相關的體外模型。這些機械特性揭示了機械力如何決定類器官的表型、形態和功能。然而,評估類器官的機械特性可能是復雜和耗時的,通常涉及損害其固有機械特性的固定方法。

Optics11 Pavone簡化了類器官評估的解決方案:通過易用的工作流程,不需要專業操作人員或廣泛培訓,最大限度地減少設備要求,處理時間和成本。此外,Pavone非破壞性地表征了活體類器官,提供更全面的機械指紋圖譜。


樣品制備

Pavone的納米壓痕技術允許在標準培養條件下對生物樣品進行機械探測。類器官的生長和分化通常涉及將它們嵌入細胞外基質支架(如Matrigel基質膠)中,這可能會損害樣品的可及性并降低測量精度。為了防止這些問題,必須采用一種經過驗證的方法從3D支架中提取類器官,例如Corning細胞恢復溶液。

此外,在基底上固定類器官是必要的,以減少壓痕期間的橫向運動。將類器官轉移到先前涂有細胞外基質蛋白(如膠原蛋白或層粘連蛋白)或聚乙烯亞胺溶液的孔板上,根據樣品的具體特性確定固定底物。


力學測試

Pavone提供用懸臂式力傳感器(探頭)記錄的機械測量,具有廣泛的剛度和尺寸范圍。選擇合適的探針尺寸和彈簧常數可以顯著提高測量質量和空間分辨率。實驗中0.5 N/m,半徑10-50 μm的探針被證明是類器官力學表征的理想選擇。

矩陣掃描功能允許通過壓入不同的位置在納米尺度上繪制類器官的機械特性。Pavone軟件可以調整間隔距離和掃描網格的范圍大小。這些參數的選擇應與所需的分辨率和類器官的總尺寸一致。不同的操作模式和壓痕輪廓可以測量特定的機械性能,如粘彈性和楊氏模量。為了以有效的方式獲得高分辨率的類器官剛度力學圖,可使用峰值負載(PLP)模式設置矩陣掃描。

為了快速篩選大量的類器官,系統支持配置一個自動壓痕序列,允許在最小的操作人員參與下獲取大量數據。


數據分析

Dataviewer軟件有助于輕松擬合Pavone獲得的載荷壓痕曲線,以提取探測區域的楊氏模量。自動生成結果的表示形式,如值分布的直方圖或空間分解的熱圖。同時,該軟件允許3D或2D顯示樣品剛度和形態的即時并行可視化。

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